列舉一些GIBCO澳洲胎牛血清使用過程的注意事項(xiàng)
瀏覽次數(shù)：1384發(fā)布日期：2021-12-22
GIBCO澳洲胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
GIBCO澳洲胎牛血清的實(shí)驗(yàn)原理:基因表達(dá)的半定量PCR檢測,真核細(xì)胞含有三類基本RNA:核糖體RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)。其中mRNA傳遞合成蛋白質(zhì)的全部遺傳信息,是蛋白質(zhì)生物合成的中間環(huán)節(jié),具有特殊意義。Trizol試劑可從細(xì)胞中快速提取細(xì)胞總RNA,將其中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,以一對(duì)特異性引物對(duì)目的cDNA進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增。由于每個(gè)循環(huán)中合成的引物延伸產(chǎn)物可作為下一循環(huán)中的模板,因而每次循環(huán)中靶DNA的拷貝數(shù)呈幾何級(jí)數(shù)增長,因此,30次PCR循環(huán)將產(chǎn)生約1億倍(230)的擴(kuò)增片段。PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),是一種在體外(試管)擴(kuò)增核酸的技術(shù)。
GIBCO澳洲胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的“座上賓”備受關(guān)注，它為細(xì)胞生長提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)。如此重要我們就更應(yīng)該關(guān)注在使用過程的注意事項(xiàng)，今天我們就注意列舉。
1、注意避免沉淀加入培養(yǎng)液
添加的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液，因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在，會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn)，除此之外，細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì)，總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長。那么為了盡可能減少血清的損失，可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理，之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。
2、注意解凍的方法
再高質(zhì)量的也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則，因此在解凍血清的時(shí)候，要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn)，事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來，便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外最好采用國際通用的解方式解凍血清。
3、注意血清的滅活方法
GIBCO澳洲胎牛血清的滅活，一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)*解凍的血清，那么需要注意的是，加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做，是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求，客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。
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